Necropsia de animales de laboratorio

En primer lugar, se ha de registrar adecuadamente el número de identificación del animal y registrarlo en los casetes a utilizar.

En el caso de los animales de laboratorio se pesará el animal, así como de todos los órganos muestreados. Esto será muy útil para calcular la relación entre el peso de los órganos y el peso corporal total. Estos datos son de especial interés cuando los animales proceden de un proyecto de toxicopatología.

Examen externo

  • Evaluación del estado general del animal y la condición corporal.
  • Registro en detalle de cualquier lesión externa, ya sea superficial en la piel o más profunda bajo la misma.
  • Examen de las mucosas y cavidades corporales, apreciando cualquier cambio de coloración u otras anormalidades.
  • Revisión de la región perineal para buscar signos de diarrea, prolapsos rectal o vaginal o cualquier otra lesión.
  • Palpación del abdomen de forma suave en busca de posibles masas o presencia de fluido. En el caso de hallar masas, realizar una descripción de su consistencia. Si el abdomen está distendido y lleno de fluido es recomendable tomar una muestra con una jeringa estéril para su evaluación.

Examen interno

Incisión de la piel y examen del tejido subcutáneo:

  • Si se dispone de placa de disección, fijaremos el animal en la misma en decúbito dorsal y humedeceremos la piel con un poco de alcohol de 70º.
  • Realizamos una incisión en la piel por la línea media que vaya desde la mandíbula hasta el pubis. En el caso de los machos la incisión finalizará a ambos lados del pene.
  • Retirar la piel hacia ambos lados de la incisión, examinando la misma y el tejido subcutáneo.
  • Examinar las glándulas mamarias: los ratones tienen 5 pares (3 torácicas y 2 abdominales), mientras que las ratas poseen 6 pares (3 torácicas y 3 abdominales). En las hembras el tejido mamario se extiende desde la región mandibular hasta la base de la cola, ocupando casi toda el área ventral del abdomen y el tórax.
  • Examinar los linfonodos superficiales, que bajo condiciones fisiológicas serán bilaterales, grisáceos y de pequeño tamaño. Los más comúnmente examinados son el mandibular, el axilar y/o el poplíteo.
  • Examinar los tres pares de glándulas salivares localizadas a ambos lados de la región cráneoventral del cuello: mandibular, sublingual y parótida. Tomar muestras de las tres extrayéndolas suavemente desde la porción más caudal hacia craneal.
  • Examen de las glándulas lacrimales extraorbitales, localizadas en la región ventrolateral de la cabeza, donde aparecen como un tejido glandular plano de color marrón grisáceo.
  • En la región inguinal observaremos la presencia de las glándulas del clítoris en hembras y las glándulas prepuciales en machos. Ambas son glándulas sebáceas modificadas que aparecen inmersas en el tejido adiposo subcutáneo.
  • Examen del pene y el prepucio en machos, que serán retirados con el resto de órganos genitales.

Apertura de la cavidad abdominal:

  • Se realiza la apertura de la cavidad por la línea media, retirando la piel hacia ambos lados y se examinan in situ los órganos, así como la membrana serosa (peritoneo) y la presencia de contenidos anormales en la cavidad.
  • Valoración del estado de engrasamiento en función de los depósitos de grasa hallados.
  • Situado en el cuadrante abdominal superior izquierdo aparece el bazo, que se extrae mediante el corte del ligamento gastro-esplénico. Es un órgano alargado, oval, ligeramente curvado y con un color rojo intenso.
  • Disección del ano de la piel circundante y apertura de la cavidad pelviana.
  • Extracción del sistema gastro-intestinal (esófago abdominal, estómago, intestino delgado, intestino grueso y linfonodos mesentéricos) en dirección cráneo-caudal, cortando la inserción del mesenterio lo más cerca posible del intestino. Separar las asas intestinales cuidadosamente.
  • El páncreas en roedores es difuso, con un lóbulo izquierdo localizado cerca del bazo y otro derecho, adyacente al duodeno. Se toma muestra del lóbulo izquierdo, el derecho se tomará con el duodeno.
  • El estómago posee dos regiones distintas: una anterior o proventricular, con apariencia blanquecina, y una glandular, más rojiza y con la pared más gruesa. Se realiza la apertura por la curvatura mayor y un lavado cuidadoso de la mucosa con solución salina o fijador.
  • El duodeno es muy corto en roedores (tan solo un centímetro), mientras que yeyuno e íleon son indiferenciables macroscópicamente. El intestino grueso se compone de ciego, colon y recto. Se toman muestras de secciones transversales de 2-3 mm de cada sección de intestino, sin abrirlo y posteriormente se realiza la apertura del intestino restante para valorar la mucosa.
  • El hígado posee cuatro lóbulos: medial, derecho medial, derecho lateral y caudado, con un proceso papilar. No hay vesícula biliar en la rata. Es un órgano frágil que debe ser manejado con cuidado. En la rata se tomará como muestra una porción de lóbulo lateral izquierdo y del lóbulo medial derecho; mientras que en el ratón se tomará también una porción del lóbulo del lóbulo medial izquierdo y de la vesícula biliar.
  • Las glándulas adrenales son estructuras pequeñas y blanquecinas situadas en la grasa perirrenal, más grandes, rosadas y translúcidas en machos; mientras que en hembras son más pequeñas, blanquecinas y opacas. Por su pequeño tamaño se fijan “in toto” (completa).
  • Los riñones son órganos localizados en la pared dorsal de la cavidad abdominal, con forma de judía y coloración pardo-rojiza. Se toman muestras “in toto” de ambos riñones o al menos una porción longitudinal de un riñón y otra transversa del otro riñón).
  • En machos:
    • Extracción y examen de los testículos en el caso de los machos, localizados en posición intra-abdominal o en el interior del escroto.
    • Valoración de glándulas accesorias masculinas: vesículas seminales, próstata (dos lóbulos ventrales y dos dorsolaterales) y glándulas coagulativas (situadas dorsocraneales a la próstata).
    • Retirada del pene, el prepucio y la uretra.

  • En hembras:
    • Diseccionar la vulva y la vagina libres de piel y cortar los ligamentos de soporte de todo el aparato reproductor, valorando cada uno de los órganos.
    • Especial importancia de los ovarios, que se encuentran dentro del tejido graso perirrenal, cerca de los polos caudales de ambos riñones.

Apertura de la cavidad torácica:

  • Realizar dos cortes laterales a cada lado de la caja torácica y otro transversal en la porción más craneal del esternón para exponer los órganos torácicos.
  • Con unas tijeras realizar un corte de la musculatura ventral torácica, incluyendo todos aquellos que se encuentran sobre la tráquea.
  • Realizar una sección transversal de la tráquea cerca de la mandíbula y traccionar de la misma en dirección ventro-caudal cortando las conexiones de los diversos órganos cervicales y torácicos con su tejido de soporte, hasta extraer todo tráquea, timo, pulmones y corazón.
  • En algunos casos se puede introducir formaldehído con un una jeringa por la abertura traqueal para asegurar una correcta fijación de los tejidos, con especial cuidado de no sobreinsuflar los pulmones.
  • Apertura de corazón para visibilizar las válvulas y el endocardio de las cuatro cavidades.

Apertura de la cavidad craneana:

  • Colocar el cadáver en decúbito esternal y retirar la piel y la musculatura que recubre la bóveda craneana, para posteriormente proceder a separar el cráneo de la columna vertebral.
  • Usando unas tijeras pequeñas de punta afilada realizar un corte hacia arriba en la línea media de la bóveda craneana introduciendo la punta por el foramen magnum.
  • Usando unas pinzas retirar ambas mitades de la bóveda craneana dejando el encéfalo expuesto.
  • Es aconsejable introducir el cráneo completo en formol, con el encéfalo en el interior de la cavidad, pero expuesto para mejorar la fijación del tejido.

De forma especial en los estudios de toxicología se realizarán de acuerdo con el protocolo de la OECD 407 según el cual se ha de realizar una necropsia completa, ordenada y sistemática de los animales con especial atención a la superficie corporal, los orificios naturales, así como a la observación de las cavidades craneal, torácica y abdominal y sus contenidos. Se recomienda el estudio minucioso de hígado, riñones, adrenales, testículos, epidídimos, próstata y vesículas seminales con glándulas sexuales accesorias (en conjunto), timo, bazo, cerebro y corazón de todos los animales; aparte de aquellos moribundos o eutanasiados antes de la fecha fin del estudio. Se eliminará cualquier tejido adherido a los mismos apropiadamente para realizar el pesado en fresco lo antes posible. Como alternativa se podrá realizar el pesado de las vesículas seminales y la próstata posteriormente a la fijación. Además de estos tejidos, opcionalmente podrá realizarse el pesado de tejidos en fresco como los ovarios y el útero (incluyendo el cérvix) o bien tras la fijación, como el tiroides.